耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠
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耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠英文名稱：rat-Protein ABerpharoseFF貨號：B2831規(guī)格：1ml本產(chǎn)品僅供科研實驗用，不做其它用途！
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耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠
英文名稱：rat-Protein ABerpharoseFF
貨號：B2831
規(guī)格：1ml
1.產(chǎn)品介紹
同普通蛋白A瓊脂糖凝膠相比，耐堿蛋白A瓊脂糖凝膠FF大大提高了凝膠的耐堿性，可以使用0.1-0.5MNaOH溶液去除熱源或?qū)δz進行清洗。瓊脂糖凝膠骨架上的延伸碳臂和重組耐堿蛋白A上的定向結(jié)合位點的設計保證了兩者之間的定向牢固鍵合以及耐堿蛋白A同抗體間的高效親和能力。
2.規(guī)格
1ml（預裝柱）、5ml（預裝柱）、10ml（預裝柱）、25ml、100ml、500ml、1L 純化流程
應用舉例：
結(jié)合緩沖液：20mM磷酸緩沖液、150mMNaCl、pH7.0
洗脫緩沖液：0.1M甘-氨酸，PH3.0或0.1M檸檬酸緩沖液，pH 4.0
中和緩沖液：1 M Tris-HCl，pH 8.5
1) 1ml耐堿蛋白A瓊脂糖凝膠FF預裝柱用5-10個柱床體積的蒸餾水洗去保存液。
2)用結(jié)合緩沖液平衡5-10個柱床體積。
3)將5ml人多抗血清用結(jié)合緩沖液稀釋到50ml，0.45μm濾膜過濾上樣。
4)用結(jié)合緩沖液再洗5-10個柱床體積。
5)用洗脫緩沖液洗脫抗體，收集洗脫峰，并用中和緩沖液調(diào)節(jié)其pH至中性。
6)每次使用后依次使用3個柱體積的結(jié)合緩沖液，5個柱體積的去離子水，5個柱體積的20%的乙醇平衡保存，防止填料被細菌污染。
7) SDS-PAGE電泳分析。
6.注意事項
1)樣品洗脫后一般pH很低，應立刻用堿性中和緩沖液（如1MTris-HCl，pH8.5）將收集到的抗體溶液中和到中性，或在收集容器中事先裝5-10%、pH7.5的緩沖液（如1MTris-HCl或1M磷酸緩沖液），以利于維持抗體的生物活性，避免抗體失活。
2)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響純化效果。
3)填料再生清洗：隨著一些變性物質(zhì)的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和結(jié)合載量下降，嚴重影響純化效果，這時需要對填料進行再生清洗（如下步驟）：先用3倍柱體積的結(jié)合緩沖液清洗，然后用至少2倍柱體的0.1-0.5 M NaOH清洗，接觸時間為15 min，最后用5倍柱體積的結(jié)合液沖洗。（注：因0.1–0.5 M NaOH粘度大易造成壓力增加，可進行反向沖洗。）
4)本產(chǎn)品保存條件：20%乙醇，4-8℃。
耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠
