HRP標記羊抗雞IgY如何正確使用

HRP標記多克隆抗體是由山羊抗血清經親和層析純化而得到高純度多克隆抗體。

一、試劑成分：

HRP* Polyclonal Goat Anti-Chicken Igy(IgG)H+L、50%甘油、PBS、穩(wěn)定劑、保護劑。

二、使用方法：

ELISA法建議在1：4000-20000選擇合適您實驗的稀釋比例，也可根據您試驗的具體情況在此建議的稀釋度范圍之外合適的使用,高可稀釋到數萬仍有使用價值。稀釋使用含0.2-0.5%BSA和0.05% 吐溫-20的0.01M的PBS（PH：7.0），也可使用其它正確的稀釋用液，原則上配成的工作液要一次使用完，不得多次使用。如確實要多次使用請在配制時加入合適的防腐劑與穩(wěn)定劑，并要求在2-8℃避光存放，但盡管如此也不要放置太久，以免對您的結果產生不良影響。因不良稀釋用液和存放而造成的損失不在投訴范圍。本品也可以用于免疫印記和免疫組化實驗。

三、注意事項：

1、雖然本試劑在有效期過后很長一段時間仍可以使用，但還是強烈建議您在管體規(guī)定的有效期內正確使用。

2、請不要在臟亂和強光環(huán)境中取用，以免造成污染和失效。

3、如果一次使用很少可以將其適當分裝后使用，這樣可以有效的防止試劑污染。

4、本二抗酶對雞其它Ig 有5-10%交叉性，也就是說跟IgM等類抗體也可以有一定反應性，實際應用良好。          

四、批號和有效期：

請查看管體標簽。

五、保存條件：

-20℃避光保存。

六、包裝規(guī)格：1ml。

七、產品濃度：1mg/ml

辣根過氧化物標記的步驟。

答：1.1 試劑準備
1) 10mg/mL HRP
2) 0.06mol/L NaIO4
3) 0.16mol/L乙二醇
4) 碳酸鹽緩沖液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸餾水中，調pH值到9.5)
5) 2.5mg/mL NaBH4
6) 0.01mol/L磷酸鹽緩沖液，pH7.4
1.2 操作步驟
1. 10mg/mL取HRP VmL，溶液為棕黃色，加入0.06mol/L NaIO4 VmL，立刻變?yōu)榛揖G色。靜置30min，4℃
2．加入0.16mol/L乙二醇VmL，溶液變回棕黃色，RT，靜置30min。
3．加入抗體Vml 5mg，CB，4℃透析過夜。
4．再加入5mg/mL NaBH4 VmL，加入后溶液有氣泡產生。室溫靜置2h。
5. 50%飽和硫酸銨鹽析一次，12000rpm，4℃離心30min。沉淀用5VmL 0.01mol/L PB重懸。裝入透析袋。
6. 溶液在0.01mol/L PB，pH7.4中透析過夜。

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