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超敏C反應(yīng)蛋白(人,大鼠,小鼠)ELISA試劑盒選擇和檢測(cè)

點(diǎn)擊次數(shù):1402     更新時(shí)間:2015-08-25

    1930年TILLETHE和FRANCIS在肺炎患者血清中發(fā)現(xiàn)了一種反應(yīng)素,它能沉淀肺炎球菌的C多糖,被稱為C反應(yīng)蛋白。CRP是炎癥標(biāo)志物,在發(fā)熱性疾病、各種炎癥狀態(tài)和創(chuàng)傷時(shí),血清CRP水平會(huì)明顯增高。以來(lái),常以健康群體CRP的95%參考值上限判斷患者有無(wú)明顯的感染性炎癥。但是,高靈敏度CRP(Hs-CRP)檢測(cè)方法的開發(fā)和應(yīng)用研究結(jié)果表明,原先認(rèn)為是正常的血清CRP水平(例如<3mg/L)的高低卻同未來(lái)的病的發(fā)生密切相關(guān)。大量研究資料表明,動(dòng)脈粥樣化的血栓形成除了是脂肪堆積過(guò)程外,也是一個(gè)慢性炎癥過(guò)程,而CRP是動(dòng)脈粥樣化的血栓形成疾病的介導(dǎo)和標(biāo)志物。CRP對(duì)心絞痛、急性冠狀動(dòng)脈綜合癥和行經(jīng)皮血管成形術(shù)患者,具有預(yù)測(cè)心肌缺血復(fù)發(fā)危險(xiǎn)和死亡危險(xiǎn)的作用。

1、C反應(yīng)蛋白的生物學(xué)特性及其與動(dòng)脈粥樣硬化
CRP是一種Υ球蛋白,分子量為105KD,主要的生物學(xué)特性有:(1)通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,消耗補(bǔ)體,釋放炎癥介質(zhì),促進(jìn)粘附和吞噬細(xì)胞反應(yīng),使細(xì)胞溶解;(2)作用于淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的受體,導(dǎo)致淋巴細(xì)胞活化、增生,促進(jìn)淋巴因子生長(zhǎng),并促進(jìn)抑制性T淋巴細(xì)胞增生,也增強(qiáng)了吞噬細(xì)胞的吞噬作用;(3)抑制血小板的聚集和釋放反應(yīng),還能妨礙血小板引起血塊收縮。在炎癥、感染、組織損傷時(shí),由于細(xì)胞因子(如白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子)等的刺激,CRP主要由肝臟生成,其血中半衰期穩(wěn)定在19小時(shí),其濃度依賴于肝臟的生成量。CRP水平是判斷組織損傷的敏感指標(biāo),在損傷的6-8h內(nèi),血清CRP量迅速升高,并在48~72小時(shí)達(dá)高峰。
zui近研究顯示,在動(dòng)脈硬化病變進(jìn)展過(guò)程中,CRP可能是反映疾病演進(jìn)的一個(gè)標(biāo)志。動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的發(fā)病和進(jìn)展中有許多炎性細(xì)胞的參與。炎癥反應(yīng)標(biāo)志物CRP能激活補(bǔ)體,引發(fā)脂質(zhì)沉積,此為AS的始動(dòng)因素之一。CRP可與脂蛋白結(jié)合,由經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng),造成血管內(nèi)膜受損。內(nèi)皮損傷導(dǎo)致的炎性物質(zhì)釋放促進(jìn)了內(nèi)皮細(xì)胞與循環(huán)血白細(xì)胞的相互作用,而與AS的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。國(guó)外學(xué)者在對(duì)CHD患者尸檢發(fā)現(xiàn),動(dòng)脈粥樣斑塊組織中有大量的炎癥細(xì)胞如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞聚集,急性冠狀動(dòng)脈綜合征斑塊破裂的部位炎性反應(yīng)zui為明顯,CRP沉積較多。這說(shuō)明AS不僅僅是脂質(zhì)沉積病,炎癥反應(yīng)在其發(fā)展和粥樣斑塊的不穩(wěn)定化過(guò)程中起了主要作用,CRP被視為粥樣病灶不穩(wěn)定的標(biāo)志之一?;顒?dòng)性炎癥可通過(guò)硬化灶纖維性被膜組織的不穩(wěn)定化,引起斑塊破裂,而發(fā)生冠狀動(dòng)脈閉塞,CRP濃度升高與事件發(fā)生率增加相關(guān)。研究人員在檢測(cè)了CRP在冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)方面的作用后提出,CRP可能在AS的炎癥反應(yīng)過(guò)程中起了促進(jìn)作用,其濃度與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。更有相關(guān)報(bào)告指出,因各種原因增高的CRP可直接促進(jìn)粥樣血栓的形成。

2、C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)方法及影響因素
CRP的檢測(cè)方法有單向免疫擴(kuò)散法、膠乳凝集法、酶聯(lián)吸附法、速率散射比濁法等,其原理都是利用特異抗CRP抗體與檢樣中CRP反應(yīng),根據(jù)形成的沉淀環(huán)直徑、沉淀峰高度、凝集程度或呈色程度,判定檢樣中CRP含量,定量標(biāo)準(zhǔn)多認(rèn)為應(yīng)<10mg/L。血清CRP主要受炎癥影響,其在血液中濃度一般相對(duì)穩(wěn)定,不受放療、化療、皮質(zhì)激素治療影響。用CRP診斷感染時(shí),應(yīng)注意其局限性:(1)CRP為一種非特異蛋白,有很多因素如損傷出血也可使其升高;(2)CRP由肝臟產(chǎn)生,當(dāng)肝嚴(yán)重?fù)p害時(shí)其增高可不明顯;(3)可有假陽(yáng)性;(4)病毒感染時(shí)CRP可不升高。目前,由于WHO的標(biāo)準(zhǔn)的建立,血中CRP測(cè)定已成為一種高精度、高靈敏度、易實(shí)行的檢測(cè)方法。近年發(fā)現(xiàn),檢測(cè)血清CRP水平對(duì)心絞痛的發(fā)病及預(yù)后判斷是一種既靈敏又具高特異性的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)。

3、血清C反應(yīng)蛋白的測(cè)定在冠心病研究中的意義
CRP與冠心病的發(fā)生及預(yù)后判斷 研究發(fā)現(xiàn),血清CRP水平與冠心病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有直接。高水平的CRP使心肌梗塞的危險(xiǎn)性增加3倍;CRP水平zui高的婦女與CRP水平zui低的相比,發(fā)生疾病的危險(xiǎn)性增加5倍,發(fā)生心肌梗塞的危險(xiǎn)性增加7倍。CRP濃度的上升與血肌、肌鈣蛋白I的濃度升高同樣,可使急性心肌梗塞(AMI)后患者或不穩(wěn)定性心絞痛(UA)患者發(fā)生意外的短期危險(xiǎn)性增加。上述較易測(cè)定之指標(biāo)可成為冠狀動(dòng)脈疾病患者的意外危險(xiǎn)性預(yù)測(cè)因子,特別是血CRP濃度可成為制定疾病預(yù)后的指標(biāo)。已知發(fā)生心肌壞死時(shí)血中CRP升高,這一現(xiàn)象提示對(duì)已有冠狀動(dòng)脈疾病的患者,其發(fā)生意外的危險(xiǎn)性,在分析CRP濃度Cutoff值的基礎(chǔ)上,已成為判斷有無(wú)心肌梗塞(AM)的非常重要的因素。但CRP增高是疾病危險(xiǎn)性增高的強(qiáng)有力的決定因素,將其作為判斷預(yù)后乃至治療效果的指標(biāo)是十分有用的。CRP是急性冠脈綜合征(CAD)的重要危險(xiǎn)因子,其水平對(duì)CAD患者的生存有獨(dú)立預(yù)測(cè)價(jià)值。CRP水平上升與UA患者住院期內(nèi)及1~2年后新的急性冠脈事件發(fā)生的危險(xiǎn)性增加有關(guān)。炎癥反應(yīng)可能引起局部血管內(nèi)皮的激活,粥樣斑塊產(chǎn)生裂隙,而導(dǎo)致UA和MI的發(fā)生。研究人員在對(duì)UA患者CRP水平入院時(shí)、48小時(shí)和出院時(shí)測(cè)定后認(rèn)為,在UA患者中,CRP是判斷90天危險(xiǎn)增加的獨(dú)立的強(qiáng)預(yù)報(bào)因子,尤其是出院時(shí)較高的CRP水平(≥8.7mg/L),可能預(yù)示著病變的不穩(wěn)定性和復(fù)發(fā)性。CRP可能成為疾病危險(xiǎn)性評(píng)價(jià)中極有價(jià)值的因素。

4、局限性
但醫(yī)生在應(yīng)用超敏C反應(yīng)蛋白于疾病的診斷及預(yù)后判斷等方面的過(guò)程中,必須了解血漿CRP濃度個(gè)體間變化,(有文章認(rèn)為個(gè)體間血漿CRP濃度變化至少為118%)必須牢記感染過(guò)程、炎癥性疾病也會(huì)引起血漿CRP升高,除疾病外,CRP還可應(yīng)用于肺部感染,慢性阻塞性肺疾病急性加重期、急性胰腺炎、肝硬化和重癥肝炎、感染性腎積水、腎膿腫、腹腔腫瘤伴感染者以及新生兒敗血癥的診斷等方面,其診斷炎癥性疾病的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值均優(yōu)于傳統(tǒng)的感染指標(biāo)如紅細(xì)胞沉降率、白細(xì)胞及嗜中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、ASO等,其水平高低與疾病預(yù)后有一定的相關(guān)性。

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