植物組織蔗糖（sucrose）含量檢測(cè)原理！
更新時(shí)間：2021-11-22 點(diǎn)擊次數(shù)：2027次植物組織蔗糖（sucrose）含量檢測(cè)原理！
蔗糖是植物光合作用的主要產(chǎn)物，也是糖分運(yùn)輸和儲(chǔ)藏的主要形式。因此，測(cè)定蔗糖含量對(duì)于植物糖代謝具有重要意義。此外，蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。
測(cè)定原理：
酸性條件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖進(jìn)一步與間苯二酚反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在480nm下有特征吸收峰。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100ml×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體5ml×1瓶，4℃保存；
試劑三：液體 40ml×1瓶，4℃保存；
試劑四：液體 10ml×1瓶，4℃保存；
試劑五：粉劑0.5g×1瓶，常溫保存。
蔗糖提取：
稱取約0.1g樣本，常溫研碎，加入1mL提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到離心管中，置于80℃水浴鍋中10min，振蕩3~5次，冷卻后，離心取上清，加入2mg試劑五，80℃脫色30min，再加入1mL提取液，離心后取上清液測(cè)定。
測(cè)定操作表（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：
試劑（μL） | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
樣本 | 100 | ||
試劑一 | 100 | ||
蒸餾水 | 100 | ||
試劑二 | 50 | 50 | 50 |
混勻，100'C煮沸5min左右（蓋緊，防止水分散失）
試劑三 | 700 | 700 | 700 |
試劑四 | 200 | 200 | 200 |
混勻，80℃水浴內(nèi)反應(yīng)10min左右，冷卻后測(cè)定480nm處光吸收值，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管分別記為A1、A2和A3。
蔗糖含量計(jì)算：
1、按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算
蔗糖含量（mg/mg prot ）＝1mg/mL ×(A3－A1)÷（A2－A1) ÷蛋白濃度mg/mL。
2、按照樣品質(zhì)量計(jì)算
蔗糖含量（mg/g鮮重）＝1mg/mL ×(A3－A1)÷（A2－A1) ÷樣品鮮重g/mL。
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其它用途！
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