總膽固醇(T-CHO)測(cè)試盒性能指標(biāo)

檢測(cè)原理：

性能指標(biāo)：

1、試劑空白管吸光度≤0.100（光徑 0.5cm）。

2、線性：0～19.39mmol/L 范圍內(nèi)，r2＞0.995。

3、精密度：CV≤3%，批間相對(duì)極差≤5%。

4、穩(wěn)定性：原裝試劑盒在 2℃～8℃避光保存，有效期為 12個(gè)月。開(kāi)啟后 2℃～8℃避光保存，可穩(wěn)定 3 個(gè)月。

所需儀器耗材及試劑： 含 500nm 波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀及 96 孔板，37℃水浴鍋或恒溫 箱，臺(tái)式低速離心機(jī)，各種規(guī)格移液器，蒸餾水，渦旋混勻 器，試管或離心管。

操作過(guò)程: 

1、樣本處理: 

①、血清(漿)：直接測(cè)定，如超過(guò)線性范圍用生理鹽水稀 釋后測(cè)定。

②、培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分 鐘，取上清測(cè)定。[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/mL 以上。 

③、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量(g):體積 (mL)=1:9 的比例，加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì)，冰水 浴條件下機(jī)械勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取 上清液待測(cè)。[注]:如組織樣本均為非高脂樣本，勻 漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生 理鹽水進(jìn)行勻漿提??；如組織樣本均為高脂樣本或 部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無(wú)水乙醇進(jìn)行 勻漿提取。

④、細(xì)胞樣本： 

A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出，1000 轉(zhuǎn)/分， 離心 10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉淀；用等滲緩沖 液（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液）清洗 1～2 次，同樣 1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，棄上清液， 留細(xì)胞沉淀； 

B、細(xì)胞破碎:加入 0.2～0.3mL 的勻漿介質(zhì)（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水）進(jìn) 行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎(功率 300W，3～5 秒/次，間隔 30 秒,重復(fù) 3～5 次)或手動(dòng)勻漿，制備好 的勻漿液不離心直接測(cè)定。也可采用裂解液裂解(推 薦 TritonX-100,1～2%,裂解 30～40 分鐘)，裂解好的 液體不離心直接測(cè)定。

[注]：建議收集的細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/mL 以上。破碎 好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎完全。