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谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)（GRAC）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

谷胱甘肽還原酶（glutathione reductase）是一種利用還原型NAD（P）將氧化型谷胱甘肽（GS－SG）催化反應(yīng)成還原型（GSH）的酶EC．1．6．4．2。

 谷胱甘肽還原酶(gluathione reductase)是人體氧化還原體系中為重要的酶之一，是維持細(xì)胞中還原型谷胱甘肽（GSH）含量的主要黃素酶。在NADPH參與下，氧化型谷胱甘肽轉(zhuǎn)化為還原型谷胱甘肽，后者在防止血紅蛋白的氧化分解、維持巰基蛋白的活性、保證巰基蛋白的還原性及細(xì)胞的完整性具有重要的作用。
測(cè)定意義： 
GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶，是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一（通常昆蟲中GR被TrxR取代）。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH，有助于維持體內(nèi) GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對(duì)活性氧清除起關(guān)鍵作用，此外GR還參與抗壞血酸－谷胱甘肽循環(huán)途徑。 
測(cè)定原理： 
GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH，同時(shí)NADPH脫氫生成NADP+；NADPH在340nm有特征吸收峰，相反NADP+在該波長(zhǎng)無吸收峰；通過測(cè)定340nm吸光度下降速率來測(cè)定NADPH脫氫速率，從而計(jì)算GR活性。
核黃素在體內(nèi)以FAD的形式與酶蛋白結(jié)合成各種黃素蛋白, 作為電子轉(zhuǎn)移系統(tǒng)參與氧化還原過程。核黃素缺乏時(shí), 產(chǎn)生皮膚、粘膜和眼部等一系列的癥狀。為了早期發(fā)現(xiàn)核黃素缺乏, 及時(shí)采取防治措施, 有必要進(jìn)行核黃素營(yíng)養(yǎng)狀況的評(píng)定。
核黃素缺乏時(shí), 谷胱甘肽活性系數(shù)迅速增高, 而補(bǔ)充核黃素后就降為正常。故谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)（Glutathione Reductase Activation Coefficient, GRAC）是評(píng)定核黃素慢性缺乏時(shí)體內(nèi)核黃素總水平的準(zhǔn)確指標(biāo)。應(yīng)用谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)（GRAC）的值評(píng)價(jià)核黃素營(yíng)養(yǎng)狀況具有靈敏、穩(wěn)定、準(zhǔn)確、微量、能反映體內(nèi)代謝利用情況等優(yōu)點(diǎn)。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約2小時(shí)，可測(cè)50例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
3、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
4、回收試驗(yàn)： X =97%。
5、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
6、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清（漿）、組織等。
所需儀器及自備試劑：
1、紫外分光光度計(jì)（比色測(cè)定波長(zhǎng)為370nm）
2、溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、高速冷凍臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織：可用特殊勻漿介質(zhì)（R1）按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

操作流程：
1、混勻，靜置5分鐘，
2、蒸餾水調(diào)零紅蛋白測(cè)定應(yīng)用液），混勻
3、0.5cm光徑
4、420nm波長(zhǎng)，0.5cm光徑比色皿，雙蒸水調(diào)零，測(cè)各管吸光度OD值。

谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)（GRAC）實(shí)驗(yàn)代測(cè)