凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過程中都有氧化還原反應(yīng)，而無生活力的種胚則無此反應(yīng)。當(dāng)TTC溶液滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為氫受體被脫氫輔酶（NADH或NADPH）還原時，可產(chǎn)生紅色的三苯基甲 （TTF），胚便染成紅色。當(dāng)種胚生活力下降時，呼吸作用明顯減弱，脫氫酶的活性亦大大下降，胚的顏色變化不明顯，故可由染色的程度推知種子的生活力強(qiáng)弱。TTC還原反應(yīng)如下：NN+ NCl+NN+HCl（無TTFTTC色）（紅色）
【儀器與用具】
培養(yǎng)皿2套；鑷子１把；單面刀片１片；墊板（切種子用）１塊；燒杯１個；棕色試劑瓶；解剖針１把；搪瓷盤１個；pH試紙。
【試劑】
TTC溶液的配制：取1g TTC溶于１L蒸餾水或冷開水中，配制成0.1％的TTC溶液。藥液pＨ應(yīng)在6.5～7.5，以pH試紙?jiān)囍ㄈ绮灰兹芙?，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）?br />【方法】
1.將玉米、小麥等作物的新種子、陳種子或死種子，用溫水（30℃）浸泡2～6h，使種子充分吸脹。
2.隨機(jī)取種子2份，每份50粒，沿種胚中央準(zhǔn)確切開，取每粒種子的一半備用。
3.把切好的種子分別放在培養(yǎng)皿中，加TTC溶液，以浸沒種子為度。
4.放入30～35℃的恒溫箱內(nèi)保溫30min.也可在20℃左右的室溫下放置40～60min.
5.保溫后，傾出藥液，用自來水沖洗2～3次，立即觀察種胚著色的情況，判斷種子有無生活力，把判斷結(jié)果記入表上。
【注意事項(xiàng)】
1.TTC溶液現(xiàn)配現(xiàn)用，如需貯藏則應(yīng)貯于棕色瓶中，放在陰涼黑暗處，如溶液變紅則不可再用。
2.染色溫度一般以25～35℃為宜。
3.判斷有生活力的種子應(yīng)具備：胚發(fā)育良好、完整、整個胚染成鮮紅色；子葉有小部分壞死，其部位不是胚中軸和子葉連接處；胚根尖雖有小部分壞死，但其它部位完好。 4.判斷無生活力的種子應(yīng)具備：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；子葉不染色或喪失機(jī)能的組織超過1/2；胚染成很淡的紫紅色或淡灰紅色；子葉與胚中軸的連接處或在胚根上有壞死的部分；胚根受傷以及發(fā)育不良的未成熟的種子。
5.不同作物種子生活力的測定，所需試劑濃度、浸泡時間、染色時間不同。現(xiàn)將主要作物種子生活力測定所需條件列入表。
TTC法測定主要作物種子生活力要點(diǎn)
在35℃下
作 物 水 稻、高粱、玉米及麥類作物 棉花、蕎麥、蓖麻 花生 甜菜 大嘛向日葵 大豆 菜豆 亞麻 二葉草
種子準(zhǔn)備 去殼縱切 縱切 剝?nèi)シN皮 剝?nèi)シN皮 無須準(zhǔn)備
TTC濃度(%)
染色時間(h)0.1 0.1 1.0 0.1 1.02～3 0.5～1 2～3 3～4 3～4   
 
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