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?Tris-HCl緩沖液的配制方法

點(diǎn)擊次數(shù):2682     更新時(shí)間:2023-02-06

Tris-HCl緩沖液的配制方法


Tris-Hcl中文全稱三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽,別稱Tris鹽酸鹽,英文名TRIS hydrochloride。相信許多人對Tris都不陌生,Tris的應(yīng)用非常廣泛,Tris緩沖液不僅被用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。


Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH。此外,Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。 作為蛋白緩沖液時(shí),若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,盡量換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。


而Tris-HCl是由Tris作為主要原料反應(yīng)得來的,其溶液呈酸性,主要用作生物緩沖液,來調(diào)整病毒保存液的pH值。如果需要調(diào)整至中性或者堿性,可以添加Tris或者NaOH來實(shí)現(xiàn)。除開這些信息外,Tris-Hcl的配置方法有哪些?你知道多少?下文將介紹Tris-Hcl的配置方法。

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Tris-HCl緩沖液的配制方法:


1、Tris-Hcl(0.05mol/L,25℃)

使50ml 0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液與x ml 0.1mol/L 鹽酸混勻后,加水稀釋至100ml

PH                 x/ml                PH                x/ml

7.1                 45.7                8.1                26.2

7.2                 44.7                8.2                22.9          

7.3                 43.4                8.3                19.9             

7.4                 42.0                8.4                17.2                

7.5                 40.3                8.5                14.7              

7.6                 38.5                8.6                12.4                 

7.7                 36.6                8.7                10.3             

7.8                 34.5                8.8                 8.5             

7.9                 32.0                8.9                 7.0                

Tris分子量=121.14:0.1mol/L溶液為12.114g/L。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳,使用時(shí)應(yīng)將瓶蓋蓋嚴(yán)。配置不同濃度和不同PH值Tris-Hcl溶液時(shí),可以先配成一定PH值的0.05mol/L溶液,再稀釋到所需濃度。


2、1M Tris-Hcl(PH7.4、PH7.6、PH8.0)

組份濃度1M Tris-Hcl

配置量 1L


配置方法:

一、稱量121.1g Tris置于1 L燒杯中;

二、加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙猓?/p>

三、按下面數(shù)值加入濃HCL量調(diào)節(jié)所需要的PH值;

PH值          濃HCL

7.4            約70ml

7.6            約60ml           

8.0            約42ml

四、將溶液定容至1L;

五、高溫高壓滅菌后,室溫保存。


Tris-HCl緩沖液的配制方法

 

 

 

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